蛋白纯不纯？选对办法很重要

  蛋白质是生物体的根本组成成分，是生命功用的执行者。深入研讨某种蛋白的功用及效果机制，对蛋白在医药、工业、科研等方面的运用具有极端严重价值。而要研讨某一个特别的蛋白，就要先将这个蛋白从生物体中别离纯化出来。蛋白纯化在蛋白工程中是必不可少的一步，从研讨蛋白的结构与功用，到对蛋白进行润饰改造，以及最终批量开发有关产品，首要都需求取得单一的蛋白。

  蛋白别离纯化是用生物工程下流技能从混合物之傍边别离纯化出所需求得意图蛋白的办法，在蛋白质研讨中起到桥梁效果，成为今世生物技能职业的中心。蛋白纯化作业杂乱，耗时长，但又十分重要。

  以合理的功率、速度、收率和纯度，将方针蛋白别离出来，一起保存其生物学活性和化学结构完整性。

  纯化依据——蛋白不同的理化性质（如分子巨细、分子形状、带电特性、溶解特性、吸附性质、与配体的特异性结合、变性和复性等）。

  常用的蛋白质别离纯化技能有膜别离技能、沉积别离技能、电泳别离技能和层析别离技能等。现在层析技能是蛋白纯化范畴的中心技能，也是运用最多最为广泛的技能。

  层析别离技能是依据被别离物与层析固定相之间的物理化学性质以及生物学性质的相互效果来进行别离。层析法的品种十分之多，运用比较广泛的有凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水层析以及亲和层析。

  6His，蛋白纯化首选标签，分子量小，对蛋白无影响，能纯化可溶性/包容体蛋白。

  MBP，增强蛋白可溶性，屏蔽毒性蛋白，标签较大，对蛋白结构/功用会有必定影响。

  Myc，高特异性，在天然洗脱条件下，运用Myc标签多肽来与重组蛋白进行竞赛，可温文洗脱Myc标签蛋白质。

  SUMO，增强蛋白可溶性，切开特异性极高，不残留任何氨基酸，合适重组蛋白表达。

  当然，有时咱们应该依据下流试验的需求将增加的蛋白标签去除，这时就要靠东西酶了。